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说说我的想法吧（第2页）

dna连接酶，连接dna片段；“分子运输车”

载体，如质粒，将目的基因送入受体细胞。

-操作基本步骤：先获取目的基因，可从基因文库获取或pcr扩增；再构建基因表达载体，将目的基因与载体结合；接着导入受体细胞，像农杆菌转化法用于植物细胞，显微注射法用于动物细胞，感受态细胞法用于微生物细胞；最后进行目的基因检测与鉴定，通过dna分子杂交、pcr等看是否插入与转录，用抗原-抗体杂交检测是否翻译出蛋白质。

-应用领域：农业上培育抗虫、抗病、抗逆作物，如转基因抗虫棉；医学上生产胰岛素、干扰素等药物，还用于基因治疗；工业可改良工业微生物品性提高生产效率；环境保护中，构建工程菌处理基因工程具体操作分四步：

1获取目的基因

-从基因文库获取：将生物dna片段导入受体菌储存，构建文库。

根据目的基因信息，用探针钓取目的基因。

-pa为模板，设计引物，在taq酶作用下，经变性、复性、延伸循环，大量扩增目的基因。

-人工合成：已知目的基因序列，用dna合成仪直接合成。

2构建基因表达载体

-用相同限制酶切割目的基因和载体，如质粒，使其产生相同黏性末端。

-用dna连接酶将目的基因与载体连接，形成重组dna分子。

3导入受体细胞

-植物细胞：常用农杆菌转化法，利用农杆菌ti质粒将目的基因整合到植物染色体。

-动物细胞：常用显微注射法，借助显微操作仪将重组dna注入受精卵。

-微生物细胞：用a。

4目的基因的检测与鉴定

-分子水平检测：dna分子杂交看目的基因是否插入；核酸分子杂交检测转录；抗原-抗体杂交检测翻译。

-个体生物学水平鉴定：对转基因生物做抗虫、抗病接种实验，观察性状。

污染物。

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